Contribution à l'isolement et culture de protoplastes à partir de suspensions cellulaires de trois cultivars de Palmier Dattier (Phœnix dactylifera L.) Tegaza, Takerbucht et Deglet Nour
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Date
2014
Authors
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Publisher
Université Mouloud Mammeri
Abstract
La maitrise des techniques de suspensions cellulaires et des cultures de protoplastes chez le palmier dattier, présente un grand intérêt tant sur le plan agronomique, peut être intégrée dans le schéma d'amélioration et de la résistance au bayoud, qu'au plan fondamental pour une meilleure connaissance de l'espèce. Les suspensions cellulaires, sont à l'origine du développement de l'embryogenèse somatique, des transformations génétiques et constituent le matériel le plus utilisé comme source de protoplastes.
Le but de cette étude est l'établissement de suspensions cellulaires afin de disposer du matériel indispensable pour l'isolement de protoplastes dans l'objectif d'obtenir des hybrides somatiques résistants au Bayoud par le biais de l'isolement et la fusion de protoplastes.
Pour cela, des cals embryogènes issus des trois cultivars Deglet Nour, Takerbucht et Tegaza sont placés sur le milieu P5 (5mg/l de picloram associé à lmg/1 d'IPA et lmg/1 de thiamine) sous une agitation continue à une vitesse de 1 OO tours/min. Les observations au cours des subcultures montrent que les cals se dissocient et libèrent des cellules de différentes formes (arrondies, ovales et allongées). Après 7 semaines de subculture, le poids frais de la suspension cellulaire est multiplié par 7 chez le cultivar Takerbucht et par 5 chez les deux cultivars Tegaza et Deglet Nour.
L'utilisation des suspensions cellulaires comme source de protoplastes a permis d'obtenir un nombre élevé de protoplastes de forme sphérique contenants de gros noyaux.
La quantité de protoplastes obtenue par gramme de suspension cellulaire initiale en fin de macération varie en fonction du cultivar, de plus les meilleurs rendements sont obtenus avec la solution enzymatique SEI (Cellulase 1,5%, 0,5% Pectolyase Y23, Hémicellulase 2%) et leur viabilité est évaluée par fluorescence di acétate (FDA).
Description
56 p. : ill. ; 30 cm. (+ CD-Rom)
Keywords
Palmier dattier, Embryogenèse somatique, Cal embryogène, Suspension cellulaire, Protoplastes, Cellulase, Pectolyase Y23, Hémicellulase
Citation
Spécialité : Génétique et Amélioration des Plantes